多巴染色与光密度法在细胞水平评价原料美白功效的应用研究,光密

1.7 原料对B16细胞黑素生成的抑制率测定方法：在6孔培养板中接种小鼠黑素瘤细胞B16，接种密度为25 000个/孔，24h待细胞贴壁后，每孔分别加入含不同浓度所测原料的培养液，以 1.7 原料对B16细胞黑素生成的抑制率测定方法：在6孔培养板中接种小鼠黑素瘤细胞B16，接种密度为25 000个/孔，24h待细胞贴壁后，每孔分别加入含不同浓度所测原料的培养液，以不加所测原料的培养液作为对照，平行3个复孔，将细胞在37℃，5%CO2的培养箱中培养。72h后，倾去培养液，用PBS缓冲液洗涤2次，采用L-多巴染色。然后，用显微镜100倍拍照，采用Image-Pro Plus6.0软件对照片进行分析，计算平均光密度值和黑素生成抑制率。